Результат серологического исследования крови расшифровка. Серологические исследования крови в диагностике болезней

Со времени открытия серологических маркеров инфекций данный анализ является основным в лабораторных исследованиях. Цель его проведения – помощь в распознавании , а также выявление недугов, обусловленных нарушением защитных функций иммунной системы.

Диагностирование гепатитов, краснухи, сифилиса, ВИЧ и многих других болезней в наше время стало доступно благодаря анализам на серологические маркеры инфекций. Расшифровка результатов исследований помогает достаточно быстро определить наличие заболеваний, которые иногда бывает трудно выявить обычными способами.

Серологический метод исследования: помощь врачу в определении природы заболеваний

Происхождение наименования «серология» — от лат. названия сыворотки (serum). Сочетание с известным logos означает «учение о сыворотке». Под серологией подразумевается раздел иммунологии, изучающий специфику взаимодействия антител сыворотки с антигенами.

Основа серологической – выявление специфических антител, образующихся в ответ на инфицирование определенным антигеном. По наличию в крови определенных антител делается заключение о характере и степени активности инфекции.

Серологический метод используется в диагностике:

герпеса
цитомегаловируса
эпидемического паротита
атипичной пневмонии
краснухи
хламидиоза
токсоплазмоза
вирусных гепатитов В и C

Исследование применяют и в случаях, когда требуется выявление причин миокардитов.

Серологические реакции могут быть применены:

В случае если нужно подтвердить диагноз. Практикуется добавление в сыворотку крови соответствующего антигена. Наличие антител доказывается либо опровергается характером ответной реакции.
В случае, когда о характере заболевания ничего не известно, видовая принадлежность антигенов, находящихся в крови, выявляется добавлением антител.

Для проведения анализа из крови предварительно удаляют компонент, ответственный за свертываемость (фиброген).

Таким образом, цель проведения серологического анализа крови:

Постановка диагноза. Исследование показано в случае, когда требуется лабораторное подтверждение присутствия в сыворотке крови возбудителя.
. Анализ поможет выявить реакцию возбудителя на различные лекарства.

Метастатическое поражение печени: требуемая диагностика и методы лечения

Использование серологического анализа практикуется и при диагностике аутоиммунных заболеваний. Проведение процедуры помогает выявить антитела к тканям организма.

Серологические маркеры гепатитов: расшифровки результатов

Вирусные гепатиты относятся к тому виду серьёзных инфекционных заболеваний, которые могут достаточно долго протекать, ничем себя особенно не проявляя. В трудности своевременного обнаружения и заключается его главная опасность.

Проведение анализа на маркеры, появляющиеся в крови как следствие введения вакцины или перенесенного заболевания, позволяет выявить гепатит в ранней фазе, в которой он лучше поддается излечению.

Виды вирусных гепатитов

Гепатит А

Этот вид (так называемая желтуха) встречается достаточно часто. Передается при употреблении инфицированных продуктов и воды. При его диагностике анализ делается на наличие антител:

Аnti-НАV IgМ. Существование в крови ранних антител свидетельствует о наличии вируса в организме не менее 25-30 дней.
Аnti-НАV IgG. Его наличие – свидетельство того, что пациент переболел данной формой гепатита в прошлом.

Гепатит В

Передается половым путем. Вирус может попасть в кровь и при использовании нестерильных инструментов. Распространен широко, при своевременном выявлении хорошо поддается лечению. По выздоровлении организм приобретает к вирусу пожизненный . Нелеченый гепатит В, вероятнее всего, перейдет в хроническую форму, которая грозит осложнениями в виде цирроза и рака печени.

При выявлении гепатита В ищут следующие маркеры:

HВsAg. Специфический антиген, показывающий наличие заболевания.
Аnti-НВs. Его появление свидетельствует о завершении процесса.
Аnti-НВс IgG. Его длительное нахождение в организме указывает на течение процесса.
Аnti-НВс IgM. Его обнаружение является признаком начальной фазы заболевания.
Аnti-НВе. Его присутствие – признак вялотекущей формы гепатита.

Наиболее тяжёлая форма заболевания. Поддается лечению лишь на ранних стадиях. Исход несвоевременно выявленной болезни – летальный.

Капли в нос, названия препаратов: сосудосуживающие, антибактериальные, гомеопатические, фитотерапия

По результатам исследований выявляются следующие маркеры:

Аnti-НСV. Свидетельствует о наличии заболевания.
Аnti-НСV IgM. Позволяет судить о достаточно недавнем заражении, что дает основания для благоприятного прогноза.

Гепатит D

Симптоматика та же, что и у гепатита В. Диагностируется присутствием аnti-НDV Ig G, характерного для гепатита В, дополненного аnti-НDV Ig M.

Гепатит Е

В целом подобен гепатиту А, но более опасен для беременных. Выявляется присутствием anti-HEV lg.

Гепатит G

По свойствам близок к гепатиту С, но менее опасен.

Маркеры внутриутробных инфекций: интерпретация результатов

– период, когда подверженность инфекциям становится достаточно острой проблемой для организма. Существует группа инфекций, которые опасны для беременных, в то время как для остальных групп пациентов не представляет угрозы. Названа эта группа ТОRСН-инфекциями. Название образовано из первых букв входящий в группу названий инфекций:

токсоплазмоз
другие инфекции (сифилис, листериоз, хламидиоз и др.)
краснуха
цитомегаловирусная инфекция

Выявленные антитела IgG означают наличие иммунитета к заболеванию. Препятствием для планирования беременности не являются.

Обнаружение IgM возможно лишь в острой стадии. Беременность можно планировать лишь после выздоровления.

Краснуха. Относится к инфекциям, передающимся внутриутробно. Перенесенное заболевание формирует пожизненный иммунитет. Тяжесть, с которой протекает заболевание, прямо пропорциональна возрасту больного. У плода инфицированной женщины велика вероятность развития тяжелых пороков. Сегодня есть возможность привиться от краснухи, тем самым избежав вероятности заболеть во время беременности. После прививки в течение некоторого времени в крови сохраняются титры IgM, поэтому от планирования беременности лучше воздержаться в течение 3 мес.

Перед прививкой нужно сделать серологический анализ, после которого можно принимать решение о проведении прививки.

Возможные результаты:

IgМ-, IgG-: обозначает отсутствие антител и необходимость вакцинации.
IgМ-, IgG+: показывает наличие иммунитета. Вакцинация не требуется.
IgМ+, IgG-: заболевание в ранней стадии, период обострения.
IgМ+, IgG+: период обострения.

Опасен ли налет на губах по утрам и как с ним бороться?

Динамика отслеживается по степени понижения IgM и увеличения IgG. Заболевание опасно в острой фазе при положительном значении IgM.

Появление в крови IgM либо IgG, если ранее их у данной пациентки не наблюдалось, означает развитие заболевания. Такой же вердикт можно вынести при 4-кратном повышении за две-три недели количества IgG. Срок давности предыдущего обследования также имеет значение: антитела могут присутствовать в крови в течение 2 лет от начала заболевания. Поэтому наличие IgM не может интерпретироваться как признак острой инфекции. Наличие IgG в снижающемся количестве – не считается заболеванием и не представляет опасности.

Если заражение произошло во II или III триместре, заболевание излечимо.

Безопасный анализ: серологическое исследование при аллергии

Диагностические анализы при аллергии проводят с помощью количественного определения иммуноглобулина Е. При этом способе аллергены связываются с антителами, образуя единый комплекс. В исследовании используется более 200 аллергенов.

Более тщательные исследования проводятся, когда нужно выявить тип и степень остроты реакции. Преимущество этого метода заключается в отсутствии прямого контакта пациента с аллергеном. При этом общие и аллергенспецифические IgE.

В определении диагноза важны не только лабораторные исследования, но и другие данные. Сопоставить их и правильно диагностировать наличие заболевания может только врач, специализирующийся в данной области. Самолечением на основании расшифровки серологических анализов заниматься нельзя.

Июн 5, 2016 Виолетта Лекарь

Серологический анализ крови представляет собой фундаментальный метод исследования, осуществляемый в целях быстрого и достоверного выявления микробов, инфекций и вирусов в организме человека. Помимо этого благодаря данному методу можно определить весь перечень существующих болезней, возникших в результате понижения иммунитета.

За счет серологического анализа осуществляется изучение забранной у пациента крови на ВИЧ, сифилис и иные опасные недуги. К тому же исследование необходимо в случае утверждения группы крови пациента и для определения специфичности белков.

Как отмечалось ранее, анализ рекомендован для диагностирования инфекционных недугов и установления стадии течения воспалительного процесса. Благодаря серологической химической реакции можно определить уровень взаимодействия антигенов и антител, отвечающих за результат.

Данный анализ применяется:

При определении числа антител, борющихся с возбудителем заболевания: в ходе анализа сыворотку крови смешивают с антигеном возбудителя болезни, после чего смотрят на происходящую реакцию.
Обратная ситуация – развивающуюся инфекцию обнаруживают за счет находящихся антигенов, выявляемых путем дополнения в кровь антител.
В случае установления группы крови.

При плохой свертываемости крови и в случае гиперкоагуляции могут произойти опасные последствия, связанные с сердечной деятельностью.

Необходимость в серологических исследованиях возрастает, когда у пациента есть подозрения на наличие половой инфекции и других заболеваний. В полученном результате пройденного анализа есть информация о наличии в крови антител к данному типу бактерий либо вирусов. Это болезни печени, корь, вирус иммунодефицита человека, герпес и др. В случае выявления антител доктор выносит заключение пациенту и определяет дальнейший курс терапии. Если есть необходимость, нужно будет пройти дополнительные исследования.

Забор материала осуществляется из локтевой вены. Анализ берется на голодный желудок с утра. Вместе с тем перед сдачей биохимического анализа на гепатит следует исключить из ежедневного рациона все овощи и фрукты, имеющие яркую окраску. Если потребуется подтверждение результатов готового анализа, можно назначить вторичное обследование без спецподготовки.

Расшифровка серологического анализа

Данное лабораторное исследование показано пациентам при появлении трудностей дифференциальной диагностики различного рода инфекций. В данном случае только серологический анализ сможет определить тип возбудителя инфекции и помочь врачу определить диагноз заболевания. К тому же огромная польза данной методики отражается при подборе лекарственной терапии пациенту, потому что возбудители многих болезней сильно различаются своей чувствительностью к действию антибиотиков и иных лекарственных средств.

Благодаря серологическому исследованию можно без труда определить наличие у человека болезни, которая была вызвана попаданием в организм скрытой инфекции. Окончив процедуру сбора материала, лаборанты выполняют расшифровку показателей, позволяющих опытным врачам в полном объеме исследовать патологии, возникшие в организме. В случае отсутствия в крови антител у человека не развивается инфекционное заболевание. При этом результат анализа будет положительным. Но это редкий случай. Как правило, при наличии симптомов болезни серологический анализ служит доказательством наличия опасной патологии. В этом случае процесс дублируется. Изначально выявляют нахождение в организме мелких возбудителей инфекции. Далее по числу антител идентифицируют степень развития воспалительного процесса.

Нормой при осуществлении данного теста считается нулевое содержание антител. Значение всегда будет означать наличие в организме патологии. В связи с этим пациенту требуется прохождение дополнительных исследований для подтверждения поставленного диагноза.

Особенности серологического исследования на сифилис, ВИЧ и гепатит

Анализ на сифилис предусматривает обнаружение белков, отвечающих за поступление в организм человека возбудителя инфекции – трепонемы бледной. Биологическим материалом в данном случае является сыворотка крови. Перед сдачей крови за 4 дня следует прекратить прием сердечных лекарственных средств и отказаться от любой алкогольной продукции. Следует отметить, что инфицирование можно установить только по истечении 1,5-2 месяцев с момента заражения. Если данный анализ выполняет беременная женщина, она должна быть готова к ложноположительному результату.

Основанием для проведения серологического анализа на гепатит могут стать такие симптомы:

беспричинная переутомляемость и бессилие организма;
плохой аппетит либо его отсутствие;
рвота;
изменения оттенка мочи и кала;
желтушность кожи лица.

Помимо этого диагностирование гепатита считается необходимым при прохождении профосмотра либо в период обследования при беременности.

Если у человека было определено положительное заключение анализа на ВИЧ-инфекцию, это не значит, что он инфицирован СПИДом. Если с момента заражения прошло менее 2 месяцев, присутствие в крови антител к вирусу иммунодефицита не может позволить подвести итог, свидетельствующий о развитии заболевания. Для этого необходимо повторить процедуру. Анализ на ВИЧ осуществляется в обязательном порядке при беременности в момент первого посещения и на 30 неделе срока.

Иммуноферментный анализ крови

Одной из популярных разновидностей серологических исследований считается иммуноферментный анализ, осуществляемый для эффективного контроля над числом антигенов и антител в сыворотке крови человека. К тому же с помощью данного метода возможно определение содержания гормонов, иммунологических комплексов и иных биологических компонентов.

При проникновении в ткань и жизненно важные органы человека биоорганических веществ иммунитет не допускает их влияния на здоровье за счет антител и иммуноглобулинов. В результате их воздействия в организме образуется комплекс антиген-антитело. Только его всесторонний анализ будет являться важной составляющей иммуноферментного метода.

В качестве основного материала, необходимого для выполнения исследования, выступает кровь пациента. В некоторых случаях, чтобы распознать вид заболевания или подобрать терапию, для анализа берут цереброспинальную и амниотическую жидкость. Иммуноферментный анализ крови как составляющее звено серологии основывается на детальном изучении кровяных молекул и иммуноглобулинов. Их особенностью является способность к обнаружению и уничтожению возбудителей инфекций совместно с определенным антигеном.

К преимуществам этого метода относят возможность определения болезни на ранних этапах ее развития, быстроту и точность результата, низкую стоимость и исключение подготовки к исследованию.

Недостатков метода немного: возможно получение ложноотрицательного результата, что требует в дальнейшем повторного тестирования.

Перед тем как сдавать какой-либо лабораторный анализ, необходимо соблюдать правила подготовки. Сбор материала должен проводиться исключительно в санитарных условиях. К тому же необходимо не допустить попадания в кровь постороннего вещества. Важным условием каждого анализа на инфекции является сдача крови исключительно натощак. При этом за день до сдачи анализа не рекомендуется употреблять жирную и острую пищу, алкогольную продукцию и сладкие напитки. Дополнительно необходимо избегать стрессовых ситуаций и любых физических нагрузок. В любом случае перед тем, как принять решение о сдаче крови на исследование, нужно пройти медицинское обследование у лечащего врача.

Услышав жалобы пациента, доктор сможет порекомендовать целесообразность сдачи серологического анализа крови.

Инфекционные болезни инициируют выработку в крови болеющего человека соответствующих антител. Так работает иммунная защита организма.

Определение наличия антител к конкретному вирусу или бактерии дает возможность узнать о наступлении заболевания до появления его основных симптомов. Сегодня серологическое и дают наиболее полную картину. Поэтому мы и поговорим в данной статье об анализе на серологическое исследование.

Что такое серологические исследования

Методы изучения биологических материалов людей и животных, способные выявлять в них антитела или антигены, которые вырабатывает организм в виде защитной реакции в борьбе с инфекциями, называют серологические исследования. Такие методы применяют для определения возбудителя инфекции, а также с целью:

определения группы крови,
изучения иммунитета через определение уровня его гуморального звена,
определения тканевых антигенов.

Кому его назначают

Зачем его делать

Метод ценится специалистами как способ сделать качественную диагностику заболевания.

Если больной находится в стадии заболевания, то повторные исследования рекомендуется проводить с интервалом примерно – неделя, чтобы наблюдать за эффективностью применяемого лечения.
Часто серологические исследования используют, чтобы определить, какой возбудитель вызвал болезнь уже после того, как пациент ее перенес.

Виды процедуры

Методы серологических исследований используют в своей основе различные реакции:

Реакция нейтрализации полагается на свойстве антител иммунной сыворотки действовать как нейтрализующее средство на токсины или сами микроорганизмы, предупреждая их повреждающее действие.
Реакция агглютинации , которая, в свою очередь, подразделяется на такие подвиды:
- прямые реакции – их применяют при исследовании сыворотки крови на присутствие антител. В изучаемый состав вбрасывают убитые микробы и, если выпадает осадок в виде хлопьев, то значит, что на этот вид микробов реакция положительная;
- реакция непрямой гемагглютинации производится введением в сыворотку крови эритроцитов, на которых адсорбированы антигены; эти агенты входят во взаимодействие с такого же рода антигенами, присутствующими в сыворотке крови, в результате этого выпадает фестончатый осадок.
Реакция с участием комплемента применяют для выявления инфекционных болезней. Метод реализуется через активацию комплемента и наблюдением за происходящими реакциями в исследуемой среде.
Реакция преципитации осуществляется наслоением раствора антигена на жидкую среду – иммунную сыворотку. Антиген для этого метода применяют растворимый. Реакция заключается в том, что комплекс антиген-антитело претерпевает осаждение; полученный осадок называют преципитатом.
Реакция с использованием меченых антигенов и антител основана на том, что микробы или антигены тканей, обработанные определенным образом, получают способность под действием ультрафиолетовых лучей излучать свет. Метод используют не только при диагностировании антигенов, но и для определения лекарственных веществ, ферментов, гормонов.

Противопоказания для проведения

В связи с тем, что метод заключается в изучении биологического материала пациента, он не может воздействовать негативно на человека. Поэтому противопоказаний к применению не имеется.

Исследование полностью безопасно.

Как проводится серологическое исследование, расскажем ниже.

Показания для проведения

Метод применяют для определения возбудителя инфекции, в том числе при таких заболеваниях:

ВИЧ-инфекция,
токсоплазмоз,
инфекционные болезни, полученные половым путем;
дифтерия,
наличие ;
бруцеллез,
стафилококковые инфекции,
гепатит.

Также метод используют для выявления таких заболеваний:

описторхоз,
амебиаз,
цистицеркоз,
лямблиоз,
пневмония.

Подготовка к процедуре

Особых приготовлений к процедуре не требуется. Следует соблюдать одно условие: забор крови делается натощак.

Алгоритм забора (взятия) крови (материала) на серологическое исследование описан ниже.

Проведение анализа

Забор крови делают из локтевой вены. Для того чтобы исследование получилось, кровь набирают не шприцом, а самотеком. В вену вводят иглу без шприца и собирают в пробирку до 5 мл крови.

Во время процедуры пациент испытывает небольшой дискомфорт во время введения иглы в вену. Последующие действия совсем не вызывают беспокойства.

Расшифровка результатов серологического исследования крови описана ниже.

Расшифровка результатов

Полученные результаты следует рассматривать совместно с клинической картиной болезни, проверкой предполагаемого диагноза с использованием нескольких тестов. Это связано с тем, что исследования имеют специфичный характер и иногда не обладают абсолютной чувствительностью к инфекционным заболеваниям.

Цена на комплексное серологическое исследование крови описана ниже.

Средняя стоимость процедуры

Какая цена процедуры будет зависеть от вида исследования. Она состоит из стоимости произведения анализа и стоимости антител к определенному возбудителю болезни. Средняя стоимость процедуры в пределах 700 руб.

Серологические реакции описаны в видео ниже:

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (лат. serum сыворотка + греч. logos учение) - методы иммунологии, изучающие специфические свойства крови человека или животных с целью выявления антигенов или антител с помощью серологических реакций.

Начало С. и. положено в конце прошлого столетия, после того как было установлено, что соединение антигена с антителом (см. Антиген - антитело реакция) сопровождается рядом доступных визуальному наблюдению феноменов - агглютинацией (см.), преципитацией (см.) или лизисом. Появилась возможность специфического распознавания антигенов (см.) или антител (см.), если один из этих компонентов известен.

В 1897 г. Ф. Видаль сообщил, что сыворотка крови больных брюшным тифом избирательно агглютинирует брюшнотифозные бактерии и поэтому эта реакция (см. Видаля реакция) может быть применена для лаб. диагностики брюшного тифа. В том же году было показано, что фильтраты культур чумных, брюшнотифозных и холерных бактерий при соединении с соответствующими иммунными сыворотками образуют хлопья, или преципитат.

Реакция преципитации оказалась пригодной для обнаружения любых белковых антигенов. В 1900-1901 гг. К. Ландштейнер нашел, что в эритроцитах людей имеются два различных антигена (А и В), а в сыворотках крови два агглютинина (а и Р), что способствовало применению реакции гемагглютинации для определения групп крови (см.).

Реакция агглютинации для определения группы крови и резус-фактора применяется в акушерской практике, при гемотрансфузиях и трансплантации тканей. Антитела против резус-фактора (см.) представляют собой неполные антитела, они не способны к прямой реакции с резус-положительными эритроцитами, поэтому для их обнаружения используют реакцию Кумбса (см. Кумбса реакция), основанную на выявлении неполных антител с помощью антиглобулиновых сывороток. К эритроцитам известной специфичности добавляют исследуемую сыворотку крови, а вслед за этим антиглобулиновую сыворотку против IgG (непрямая реакция Кумбса). Fab-фрагменты неполных антител исследуемой сыворотки крови присоединяются к эритроцитам, а к свободным Fc-фрагментам этих антител присоединяются антитела против IgG, и происходит агглютинация эритроцитов. Для диагностики гемолитической анемии используют прямую реакцию Кумбса, В организме таких больных эритроциты соединяются с циркулирующими в крови антителами против резус-фактора. Чтобы их выявить, к эритроцитам, взятым у больного, добавляют антитела против IgG. Появление агглютинации эритроцитов подтверждает диагноз болезни.

Реакция торможения гемагглютинации - РТГА (см. Гемагглютинация) - основана на феномене предотвращения (торможении) иммунной сывороткой гемагглютинации эритроцитов вирусами. Феномен вирусной гемагглютинации не является серол. реакцией и происходит в результате соединения вируса с рецепторами эритроцитов, однако РТГА представляет собой серологическую реакцию, используемую для выявления и титрования противовирусных антител. РТГА - основной метод серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители к-рых обладают гемагглютинирующими свойствами.

Реакция пассивной, или непрямой, гемагглютинаций, В ней используют эритроциты или нейтральные синтетические хчатериалы (напр., частицы латекса), на поверхности к-рых сорбированы антигены (бактериальные, вирусные, тканевые) или антитела (см. Бойдена реакция). Агглютинация их происходит при добавлении соответствующих сывороток или антигенов. Эритроциты, сенсибилизированные антигенами, называют антигенным эритроцитарным диагностикумом и используют для выявления и титрования антител. Эритроциты, сенсибилизированные антителами, называют иммуноглобулиновыми эритроцитарными диагностикумами (см.) и используют для выявления антигенов:

Реакция пассивной гемагглютинации применяется для диагностики заболеваний, вызванных бактериями (брюшной тиф и паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), простейшими (малярия) и вирусами (грипп, аденовирусные инфекции, клещевой энцефалит, крымская геморрагическая лихорадка и др.). Реакция пассивной гемагглютинации по чувствительности не уступает методу выделения вируса при ареновирусных болезнях (см.), в частности при лимфоцитарном хориоменингите. Вирусный антиген лимфоцитарного хориоменингита выявляется у вирусоносителей (домовых мышей) в реакции пассивной гемагглютинации с суспензиями извлеченных органов, разведенными в десятки тысяч раз. При сальмонеллезе в реакции пассивной гемагглютинации определяются бактерии при концентрации до нескольких сотен микробных тел в 1 г фекалий, дизентерийные бактерии в пищевых продуктах выявляются при содержании в 1 г материала не менее 500 микробных тел.

Реакция пассивной гемагглютинации используется в диагностике и профилактике вирусного гепатита В. В Советском Союзе для выявления HBs-антигена (см. Австралийский антиген) в крови больных с острым гепатитом В производится диагностикум, представляющий собой эритроциты кур, сенсибилизированные козьим иммуноглобулином против HBs-антигена. Каплю диагностикума соединяют с равным объемом сыворотки крови обследуемых людей, и, если в ней присутствует HBs-антиген, происходит агглютинация. Реакция способна уловить до 1,5 нг/мл HBs-антигена. Для обнаружения HBs-антител используют эритроциты с сорбированным на них HBs-антигеном, выделенным из крови больных. Реакцию пассивной гемагглютинации применяют также для выявления повышенной чувствительности больного к лекарственным препаратам и гормонам, напр, пенициллину или инсулину. В этом случае эритроциты 0 группы крови человека сенсибилизируют лекарственным веществом и затем используют для выявления к нему агглютининов в сыворотке крови больного.

Реакцию пассивной гемагглютинации используют для выявления гонадотропного гормона в моче с целью установления беременности (см. Хорионический гонадотропин). Для этого стандартная сыворотка к этому гормону инкубируется с исследуемой мочой. При последующем добавлении эритроцитов с сорбированным на них гормоном агглютинация не наступает (положительный ответ), т. к. содержащийся в моче гормон нейтрализовал агглютинирующие антитела.

Реакции, основанные на феномене преципитации

Их используют для определения самых разнообразных антигенов и антител. Простейшим примером качественной реакции является образование непрозрачной полосы преципитации на границе наслоения антигена на антитело в пробирке. Широко применяются различные разновидности реакции преципитации в полужидких гелях агара или агарозы (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлоню, метод радиальной иммунодиффузии, иммуноэлектрофорез), к-рые носят одновременно качественный и количественный характер (см. Иммунодиффузия , Иммуноэлектрофорез).

Для постановки двойной иммунодиффузии наливают слой растопленного геля на стеклянную пластинку и после затвердевания вырезают лунки диаметром 1,5-3 мм. В расположенные по кругу лунки помещают исследуемые антигены, а в центральную лунку - иммунную сыворотку известной специфичности. Диффундируя навстречу друг другу, гомологичные сыворотки и антигены образуют преципитат. При радиальной иммунодиффузии (по методу Манчини) иммунную сыворотку вносят в агар. Антиген, помещенный в лунки, диффундирует через агар, и в результате преципитации с иммунной сывороткой вокруг лунок образуются непрозрачные кольца, внешний диаметр к-рых пропорционален концентрации антигена. Модификацию этой реакции используют в диагностике гриппа для распознавания IgM- и IgG-антител (см. Иммуноглобулины). В агар вносят гриппозный антиген, а в лунки сыворотки крови. Затем пластины обрабатывают иммунными сыворотками против IgM- или IgG-антител, что способствует выявлению реакции соответствующих антител с антигенами. Метод позволяет одновременно определять титры антител и принадлежность их к определенному классу иммуноглобулинов.

Разновидностью иммуноэлектрофореза является радиоиммунофорез. В этом случае после электрофоретического разделения антигенов в канавку, вырезанную параллельно движению антигенов в геле, наливают сначала меченную радиоактивным йодом иммунную сыворотку против определяемых антигенов, а затем иммунную сыворотку против IgG-антител, к-рая преципитирует образовавшиеся комплексы антитела с антигеном. Все несвязавшиеся реагенты вымывают, а комплекс антиген - антитело обнаруживают методом авторадиографии (см.).

Реакции с участием комплемента. Реакции с участием комплемента (см.) основаны на способности субкомпонента комплемента Cl(Clq) и затем других компонентов комплемента присоединяться к иммунным комплексам.

Реакция связывания комплемента позволяет титровать антигены или антитела по степени фиксации комплемента комплексом антиген - антитело. Эта реакция состоит из двух фаз: взаимодействия антигена с испытуемой сывороткой крови (исследуемая система) и взаимодействия гемолитической сыворотки с бараньими эритроцитами (индикаторная система). При положительной реакции в исследуемой системе происходит связывание комплемента, и тогда при добавлении сенсибилизированных антителами эритроцитов не наблюдается гемолиза (см. Реакция связывания комплемента). Реакция широко применяется для серодиагностики висцерального сифилиса (см. Вассермана реакция) и вирусных инфекций (см. Вирусологические исследования).

Цитолиз. Антитела против клеточных структур могут при участии комплемента растворять клетки, несущие эти структуры. Лизис эритроцитов легко оценивать по степени и интенсивности освобождения гемоглобина. Лизис нуклеарных клеток оценивают путем подсчета процента мертвых клеток, к-рые не окрашиваются метиленовым синим. Часто также используют радиоактивный хром, к-рый предварительно химически связывают с клетками. Число разрушенных клеток определяют по количеству несвязанного хрома, освобождающегося при лизисе клеток.

Реакция радиального гемолиза эритроцитов может протекать в геле. Взвесь эритроцитов барана помещают в агарозный гель, добавив туда комплемент; в застывшем на стекле слое делают лунки и вносят в них гемолитическую сыворотку. Вокруг лунок в результате радиальной диффузии антител будет образовываться зона гемолиза. Радиус зоны гемолиза прямо пропорционален титру сыворотки. Если сорбировать на эритроцитах какой-либо антиген, напр, гликопротеиновый гемагглютинин вируса гриппа, краснухи или клещевого энцефалита, то можно воспроизвести феномен гемолиза иммунными сыворотками к этим вирусам. Реакция радиального гемолиза в геле нашла применение в диагностике вирусных инфекций благодаря простоте постановки, нечувствительности к сывороточным ингибиторам, возможности титровать сыворотки крови по диаметру зоны гемолиза, не прибегая к серийным разведениям.

Иммунное прилипание. Эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови имеют на поверхности рецепторы к третьему компоненту комплемента (C3). Если к антигену (бактерии, вирусы и др.) добавить соответствующую иммунную сыворотку и комплемент, то образуется комплекс антиген - антитело, покрытый C3-компонентом комплемента. При смешивании с тромбоцитами благодаря C3-компоненту комплемента комплекс антиген - антитело осядет на клетках и вызовет их агглютинацию (см. Иммунное прилипание). Эта реакция применяется для определения антигенов системы HLA (см. Иммунитет трансплантационный) и при изучении ряда вирусных -инфекций (клещевой энцефалит, лихорадка денге), к-рые сопровождаются иммунопатол. процессами и циркуляцией в крови вирусных антигенов в комплексе с антителами.

Реакция нейтрализации основана на способности антител нейтрализовать нек-рые специфические функции макромолекулярных или растворимых антигенов, напр, активность ферментов, токсины бактерий, болезнетворность вирусов. В бактериологии эта реакция используется для обнаружения антистрептолизинов, антистрептокиназы и антистафилолизинов. Реакцию нейтрализации токсинов можно оценивать по биол. эффекту, так, напр., титруют антистолбнячные и антиботулинические сыворотки (см. Токсин - антитоксин реакция). Смесь токсина с антисывороткой, введенная животным, предотвращает их гибель. Различные варианты реакции нейтрализации применяют в вирусологии. При смешивании вирусов с соответствующей антисывороткой и введении этой смеси животным или в клеточные культуры патогенность вирусов нейтрализуется.

Реакции с использованием химических и физических меток

Иммунофлюоресценция, разработанная Кунсом (А. Н. Coons) в 1942 г., заключается в использовании для серол. реакций меченных флюорохромом сывороток (см. Иммунофлюоресценция). Меченная флюорохромом сыворотка образует с антигеном комплекс антиген - антитело, к-рый становится доступным наблюдению под микроскопом в ультрафиолетовых лучах, возбуждающих свечение флюорохрома. Реакцию прямой иммунофлюоресценции используют для изучения клеточных антигенов, выявления вируса в зараженных клетках и обнаружения бактерий и риккетсий в мазках. Так, для диагностики бешенства отпечатки кусочков мозга животных, подозреваемых на вирусоносительство, обрабатывают люминесцирующей антирабической сывороткой. При положительном результате в протоплазме нервных клеток наблюдаются глыбки ярко-зеленого цвета. На обнаружении антигенов вирусов в клетках отпечатков со слизистой оболочки носа основана экспресс-диагностика гриппа, парагриппа и аденовирусной инфекции.

Более широко применяется метод непрямой иммунофлюоресценции, основанный на выявлении комплекса антиген - антитело с помощью люминесцирующей иммунной сыворотки против IgG-антител и используемый для обнаружения не только антигенов, но и титрования антител. Метод нашел применение в серодиагностике герпеса, цитомегалип, лихорадки Ласса. В лаборатории должен храниться при г°-20° запас препаратов антигенсодержащих клеток, напр, выращенные на кусочках тонкого стекла и зараженные вирусом клетки VERO или куриные фибробласты, зафиксированные ацетоном. На препараты наслаивают исследуемую сыворотку крови, помещают препарат в термостат при f 37° для образования иммунных комплексов, а затем после отмывания несвязавшихся реагентов выявляют эти комплексы меченой люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Применяя меченые иммунные сыворотки против IgM-или IgG-антител, можно дифференцировать тип антител и обнаруживать ранний иммунный ответ по наличию IgM-антител.

В энзим - иммунологическом методе применяют антитела, конъюгированные с ферментами, гл. обр. пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой. Чтобы обнаружить соединение меченой сыворотки с антигеном, добавляют субстрат, разлагающийся присоединенным к сыворотке ферментом с появлением окрашивания в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфатаза) цвет. Используют также ферменты, разлагающие не только хромогенный, но и люмогенный субстрат. В этом случае при положительной реакции появляется свечение. Подобно иммунофлюоресценции, энзимиммунологический метод применяют для обнаружения антигенов в клетках или титрования антител на антигенсодержащих клетках.

Наиболее популярной разновидностью энзим-иммунологического метода является иммуносорбция. На твердом носителе, к-рым могут быть целлюлоза, полиакриламид, декстран и различные пластмассы, сорбируют антиген. Чаще носителем служит поверхность лунок микропанелей. В лунки с сорбированным антигеном вносят исследуемую сыворотку крови, затем меченную ферментом антисыворотку и субстрат. Положительные результаты учитывают по изменению цвета жидкой среды. Для обнаружения антигенов на носитель сорбируют антитела, затем вносят в лунки исследуемый материал и проявляют реакцию меченной ферментом антимикробной сывороткой.

Радиоиммунологический метод основан на применении радиоизотопной метки антигенов или антител. Первоначально он был разработан как специфический метод измерения уровня циркулирующих в крови гормонов. Тест-системой являлся меченный изотопом гормон (антиген) и антисыворотка к нему. Если к такой антисыворотке добавить материал, содержащий искомый гормон, то он свяжет часть антител, при последующем внесении меченого титрованного гормона с антителами свяжется уменьшенное по сравнению с контролем его количество. Результат оценивают по сопоставлению кривых связанной и несвязанной радиоактивной метки. Эта разновидность метода носит название конкурентной реакции. Существуют и другие модификации радиоиммунологического метода. Радиоиммунологический метод - наиболее чувствительный метод определения антигенов и антител, используемый для определения гормонов, лекарственных веществ и антибиотиков, для диагностики бактериальных, вирусных, риккетсиозных, протозойных заболеваний, исследования белков крови, тканевых антигенов.

Сравнительная характеристика и использование методов серологических исследований в медицинской практике

Методы С. и. непрерывно совершенствуются в направлении повышения чувствительности и универсальности использования. Изначально серол. диагностика основывалась на выявлении антител. С появлением в середине 20 в. реакций иммунофлюоресценции и пассивной гемагглютинации, обладающих большей чувствительностью, появилась возможность обнаруживать не только антитела, но и антиген непосредственно в материале от больных. Энзим-иммунологический и радиоиммунологический методы, по чувствительности на 2-3 порядка превышающие иммунофлюоресценцию и пассивную гемагглютинацию, приближаются к методам биол. обнаружения бактерий и вирусов. Область их применения для обнаружения как антигенов, так и антител теоретически не ограничена.

Серодиагностика инф. болезней базируется на появлении антител к выделенному или предполагаемому возбудителю независимо от того, был ли обнаружен возбудитель в острой стадии болезни. Исследуют пары сывороток крови, взятых в начале болезни и 2-3 нед. спустя. Прирост антител во второй сыворотке крови не менее чем в 4 раза по сравнению с первой является диагностически значимым. Имеет также значение, каким классом иммуноглобулинов представлены антитела. IgM-антитела обнаруживают в конце острого периода болезни и в ранней стадии реконвалесценции. IgG-антитела появляются в более поздние сроки реконвалесценции и циркулируют долго. Если у женщины в первом триместре беременности обнаруживают IgM-антитела к вирусу краснухи, то это служит основанием для прерывания беременности, т. к. в этот период плод особенно чувствителен к вирусу. При разных инф. болезнях избирательно используют наиболее специфические и удобные в исполнении методы.

С. и. широко применяют в эпидемиологии. Систематический сбор и исследование образцов крови различных групп населения позволяют уяснить контакты населения с источником возбудителей инф. болезней. Изучение уровня коллективного иммунитета позволяет выявлять группы повышенного риска и планировать прививочные мероприятия, изучать географическое распространение инфекций. С. и. различных возрастных групп населения позволили, напр., ретроспективно выявить циркуляцию разных вариантов вируса гриппа в определенные периоды времени.

С. и. имеют большое значение в изучении наследственных болезней (см.) и аутоиммунных болезней, сопровождающихся появлением ткане- и органоспецифических антител, разрушающих соответствующие клетки-мишени, а также в онкологии для обнаружения опухолевых антигенов. Так, иммунодиагностика рака печени основана на определении в сыворотке крови больных альфа-фетопротеина и других эмбриональных антигенов методом иммунодиффузии и радиоиммунологическим методом.

Значительный прогресс науки в изучении тонкой антигенной структуры клеточных антигенов, антигенов бактерий и вирусов достигается благодаря применению в серол. реакциях моноклональных антител, к-рые можно получать к отдельным детерминантам антигена.

Библиография: Методы исследований в иммунологии, под ред. И. Лефковитса и Б. Перниса, пер. с англ., М., 1981; Руководство по иммунологии, под ред. О. Е. Вязова и Ш. X. Ходжаева, М., 1973; Руководство по клинической лабораторной диагностике, под ред. В. В. Меньшикова, М., 1982; Immunology, ed. by J.-F. Bach, N. Y., 1978.

С. Я. Гайдамович.

Серологический анализ крови - это один из методов лабораторной диагностики, позволяющий выявить инфекционный процесс в детском организме и степень его развития. В основе результатов данного исследования лежит степень взаимодействия антител и антигенов. Так, проведя подобный анализ, наш специалист может определить, присутствуют ли в организме ребенка антитела к определенным вирусам или бактериям, включая , гепатиты, ВИЧ-инфекцию и т.д. При обнаружении таких антител наш врач ставит предварительный диагноз и назначает уточняющие обследования.

Серологический анализ крови применяется в следующих целях:

выявление количества антител к конкретным инфекционным возбудителям. Для этого в сыворотку крови добавляются антигены возбудителя;
анализ может проводиться и по противоположному алгоритму, когда в сыворотку крови добавляются антитела возбудителя для определения его антигенов;
определение группы крови.

Помимо диагностического исследования маленького пациента, серологический анализ крови может быть назначен нашим врачом для оценки эффективности проводимого лечения, а также после завершения терапевтического курса.

Подготовка к серологическому анализу крови

Кровь для серологического исследования берется из вены в утреннее время суток натощак. Детям старшего возраста перед анализом не следует давать жирной пищи. Если исследование проводится для выявления вирусных гепатитов, за два-три дня до него необходимо исключить употребление любых ярко окрашенных фруктов, овощей, а также соков.

Важно помнить, что отрицательный результат серологического анализа не дает стопроцентной гарантии того, что заболевание в организме отсутствует. Если у врача возникнут сомнения в достоверности результатов, он может назначить повторный анализ через несколько дней.